海棠叶根皮苷的提取及抗肿瘤活性研究

海棠叶根皮苷的提取及抗肿瘤活性研究
作 者 : 邵耀东
学位授予单位 : 西北农林科技大学
学位名称 : 硕士
导师姓名 : 赵宝玉
学位年度 : 2017
关键词 : 海棠;根皮苷;提取;抗氧化;肿瘤;凋亡
摘 要 : 海棠,是苹果属(Malus)多种植物和木瓜属(Chaenomeles)几种植物的通称与俗称,在我国各地多有栽培。本文主要研究海棠叶提取物的提取工艺,并对其结构、抗氧化作用及抗肿瘤活性的研究,为进一步研究海棠叶根皮苷的药理学作用机制,奠定了试验和理论基础。采用水作为提取得溶剂,于80℃回流提取2次,合并2次提取液并减压浓缩、结晶,以红外光谱法对析出的结晶进行定性验证;后期考察了根皮苷样品对DPPH、羟基自由基、金属离子自由基(Fe2+)及ABTS自由基的清除效果。并以癌细胞为细胞模型,以MTT检测、活化氧(ROS)检测、TUNEL检测、JC-1检测和免疫细胞荧光等方法,验证根皮苷的抗肿瘤活性。结果表明:本试验建立了海棠叶根皮苷的水提取工艺,并得到了根皮苷成品;根皮苷对各种自由基具有一定的清除作用,清除效果依次为ABTS自由基>DPPH自由基>羟基自由基>金属离子Fe2+自由基,且具有一定的浓度依赖性,此即为根皮苷的抗氧化活性研究奠定了良好的基础。海棠叶的提皮苷对卵巢癌细胞Skov3和A2780、海拉细胞Hela具有一定的细胞毒性,能杀死癌细胞;较之对照组,根皮苷处理组Skov3细胞内ROS的表达量显著增加,根皮苷还会造成核DNA的泄露,并伴随着组蛋白γ-H2AX和RAD51位点的生成,最终导致细胞的凋亡。由此表明,海棠叶的提取物根皮苷具有抗肿瘤的活性。此研究为根皮苷广泛用于抗肿瘤的研究与治疗提供基础数据。

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